practica de glucosa en orina ; equipo 10 grupo 6.- L

Practica de glucosa en orina

El método de Benedict es un test de reducción que se basa en la reducción de algunos iones metálicos por la glucosa. La reducción de los iones metálicos como el Cu++ no es especifica de la glucosa, la reacción puede ser originada por cualquier sustancia reductora presente en orina (creatinina, ácido úrico, ácido ascórbico y otros azucares reductores). La no especificidad del test del cobre puede dar falsos positivos.

Como el valor esta por encima de 160mg/dl (umbral renal) se trata de una glucosuria
( cantidad detectable de melituria(presencia de azúcar en orina: gluc, galact, fruct)en orina).En este caso se puede dar por tres motivos:

Glucosuria renal o normoglucemia: Aumento de glucosa en orina pero los valores en sangre son normales, ya que la reabsorción tubular de la glucosa es menor de lo normal = glucosa en orina. Aparece normalmente después de una comida copiosa o en caso de estrés emocional, a veces en embarazo.

Diabetes mellitus: El aumento de glucosa en orina esta relacionado con un aumento de glucosa en sangre (poliuria acompañada de polidipsia)= orina clara con elevada densidad debido a los sólidos disueltos.

Alteraciones hormonales

-b) 150mg/dl:Glucosa oxidasa (método enzimático completamente automatizado)

Glucosa gluc-oxidasa Ac glucónico + H2O2

2H2O2 peroxidasa 2H2O + O2

El oxigeno liberado oxida una sustancia que en forma oxidada presenta color. Si a la misma reacción le añadimos un cromógeno en su forma reducida (incoloro) pasará a su forma oxidada (coloreada).

la reacción quedará: Glucosa gluc-oxidasa Ac glucónico + H2O2

H2O + fenol + cromógeno peroxidasa 2H2O + quinosa coloreada

El derivado quinónico coloreado puede medirse en el espectrofotómetro ( método de Trinder); la intensidad de color es directamente proporcional a la cantidad de glucosa en la muestra.
Determinación de fructosaminas: porque si medimos la concentración de glucosa en un día no podemos saber si el paciente a seguido la dieta como tocaba o lo ha hecho solo los dos últimos días, por eso buscamos fructosaminas (cetoaminas) que son proteínas pragmáticas a las que se une la glucosa irreversiblemente; por lo tanto si la concentración de la glucosa aumenta, aumentan las fructosaminas.
Las fructosaminas tienen una vida media de 30 días, así que podemos controlar la glucosa en el plasma del individuo en las últimas 3 semanas.
Determinación de la hemoglobina glicosilada (HbA1c): dentro del eritrocito hay muchos tipos de Hb, la más abundante (90%) es la HbA0 que es la mayoritariamente glicosilada. Una vez la glucosa entra, se une por mecanismos no enzimáticos a las Hb formando glucohemoglobinas (Hb unidas a azúcares por enlaces covalentes) en cantidad proporcional al de glucosa celular.
Glucosa + HbA Base de Schiff inestable HbA1c (glicosilada)
La HbA1c es la fracción principal de la glucohemoglobinas que se divide en subfracciones (A1a + A1b + A1c + A1d). A1c es la predominante y la mejor caracterizada.

El reactivo de Fehling, es una solución descubierta por el químico alemán Hermann von Fehling y que se utiliza como reactivo para la determinación de azúcares reductores. Sirve para demostrar la presencia de glucosa, así como para detectar derivados de esta tales como la sacarosa o la fructosa.

Materiales:                                                               Reactivos

1 tubo de ensaye                                                              Solución de Fehling          

1 vaso de precipitado                                                      Muestra de orina

1 varilla de vidrio

Técnica:

1.- Realizar una dilución de la orina al 50 % con H₂O destilada

2.-  Agregar unas gotas de reactivo de Fehling

3.- Agregar hasta observar un cambio en su coloración

Conclusión: El reactivo de Fehling hace que la orina cambie a un color aproximadamente rojo si es que existe glucosa en el contenido de la orina.

Cuestionario

1.- ¿Como se compone el reactivo de Fehling?

• Sulfato de cobre cristalizado, 35 g; agua destilada, hasta 1.000 ml.
• Sal de Seignette (tartrato mixto de potasio y sodio), 150 g; solución de hidróxido de sodio al 40%, 3; agua, hasta 1.000 ml.

2.- ¿ Como cambia el reactivo de Fehling cuando existe glucosa?

A color rojo